血清或血漿(K₂EDTA、Lithium heparin、sodium heparin) 1mL(或全血3mL檢體)。採檢時間應視劑量、輸注時間及病人之臨床狀況而定。
血清(血漿)分離後，室溫下可保存1天，2天以上請保存於2-8℃送檢。請注意檢體應避光保存，不能使用含膠的採檢管。冷凍穩定時間5天。
高劑量MTX急救治療Carboxypeptidase G2用藥的病患檢體將產生交叉反應，不能使用於本項檢查上。

檢體退件：溶血4+；錯誤的血漿檢體(Sodium Citrate、NaF)

雖然methotrexate濃度低於0.02 μmol/L左右已被發現是DNA重新開始合成所必需，但其血清濃度與抗腫瘤療效之間的明確關聯性尚未被確立。已有人證實在預測methotrexate毒性時，血清methotrexate藥物濃度與暴露到腫瘤細胞的時間之相關性。

Methotrexate是葉酸的抗代謝物。它是一種模擬胺基甲基葉酸的物質，分子的結構不同於葉酸。

methotrexate是一種可單獨使用或與其他抗腫瘤藥物結合，使用於治療白血病及其他疾病的抗腫瘤藥物。相當低劑量的methotrexate已被用來治療嚴重牛皮癬、氣喘、類風濕性關節炎、類肉瘤病(sarcoidosis)及移植治療等非惡性疾病。中到高劑量之methotrexate配合leucovorin (citrovorum-factor)用來治療惡性骨肉瘤(osteogenic sarcoma)、白血病、非何杰金氏淋巴瘤、肺癌及乳癌已有不錯的效果。

Methotrexate需監控以避免過度的毒性作用，不良反應包括骨髓抑制，口腔炎，噁心，嘔吐，抽搐，肝，腎異常，貧血，白細胞減少，血小板減少症，骨質疏鬆症，神經毒性，和腦白質病變。

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